微小RNA-3651对结肠癌细胞增殖凋亡及PTEN表达的影响

作者：熊非; 陈继贵

来源：临床肿瘤学杂志, 2017, 22(10): 865-868.

• 结肠癌
• 微小RNA-3651
• 10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源物
• 增殖
• 凋亡

目的探讨微小RNA-3651(miR-3651)对结肠癌细胞SW620增殖凋亡及10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源物(PTEN)表达的影响。方法采用Lipofectamine~ 2000脂质体法将miR-3651抑制剂(Inhibitor组)及阴性对照片段(NC组)分别转染至SW620细胞,转染24 h后采用实时定量PCR(QPCR)法检测两组细胞的miR-3651水平,采用MTT法检测转染0、12、24、48 h后两组的吸光度以评价增殖活力情况,采用流式细胞术和Western blotting检测两组转染后的凋亡率及凋亡相关蛋白(PTEN和caspase-3)的表达情况;双荧光素酶报告实验检测荧光素酶活性以验证miR-3651对PTEN的靶向调控作用。结果转染24 h后Inhibitor组的miR-3651水平为0.482±0.159,低于NC组的1.015±0.241,差异有统计学意义(P<0.05)。与NC组相比,Inhibitor组SW620细胞的增殖活力明显减弱(P<0.01)。Inhibitor组SW620细胞的凋亡率为(20.46±3.72)%,明显高于NC组的(4.73±0.85)%,差异有统计学意义(P<0.01)。Inhibitor组的PTEN和caspase-3水平分别为1.457±0.369和1.862±0.247,高于NC组的0.547±0.127和0.665±0.154,差异有统计学意义(P<0.05)。miR-3651显著抑制野生型PTEN-3’UTR质粒转染细胞的荧光素酶活性,而对突变型PTEN-3’UTR质粒转染细胞的荧光素酶活性无影响。结论 MiR-3651可以抑制结肠癌细胞SW620的增殖并诱导其凋亡,可能与其靶向调控PTEN表达有关,可作为结肠癌潜在的分子治疗靶点。

• 单位
  武汉市第八医院