依托咪酯通过调控miR-211-5p/ROBO1的表达抑制胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的机制研究

作者：王冬梅; 徐碧钰; 杨涛; 何娟; 赵华平; 吕帅; 邢娜^*

来源：中国药学杂志, 2020, 55(20): 1686-1695.

• 依托咪酯
• miR-211-5p
• ROBO1
• 胃癌细胞
• 增殖
• 迁移
• 侵袭

目的探究依托咪酯通过调控miR-211-5p/ROBO1的表达抑制胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的机制。方法 qRT-PCR、Western blot检测依托咪酯对胃癌AGS和MNK-45细胞中miR-211-5p和ROBO1表达的影响,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测对细胞增殖的影响,Transwell实验检测对细胞侵袭、迁移能力的影响,双荧光素酶报告实验和Western blot检测miR-211-5p与ROBO1的联系,过表达miR-211-5p或者抑制ROBO1的表达,观察对胃癌AGS和MNK-45细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响。结果与对照组比较,依托咪酯0.2、0.4和0.8μg·mL-1组胃癌AGS和MNK-45细胞的增殖抑制率、miR-211-5p、p21水平呈剂量依赖性升高,迁移和侵袭细胞数目、ROBO1、cyclin D1、MMP-2、MMP-9水平呈剂量依赖性降低(P<0.05);TargetScan生物信息学软件预测显示,miR-211-5p与ROBO1 3′UTR存在互补序列;双荧光素酶报告实验显示,miR-211-5p与ROBO1存在特异性结合位点;Western blot验证显示,miR-211-5p负向调控ROBO1的表达;与miR-NC比较,过表达miR-211-5p后,miR-211-5p组胃癌AGS和MNK-45细胞的增殖抑制率、p21水平显著升高,迁移和侵袭细胞数目、cyclin D1、MMP-2、MMP-9蛋白水平显著降低(P<0.05);与si-NC比较,抑制ROBO1表达后,si-ROBO1组胃癌AGS和MNK-45细胞的增殖抑制率、p21水平显著升高,迁移和侵袭细胞数目、ROBO1、cyclin D1、MMP-2、MMP-9蛋白水平显著降低(P<0.05);与依托咪酯+anti-miR-NC组比较,依托咪酯+anti-miR-211-5p组胃癌AGS和MNK-45细胞中miR-211-5p、p21、细胞增殖抑制率显著降低,迁移和侵袭细胞数目、ROBO1、cyclin D1、MMP-2、MMP-9蛋白水平显著升高(P<0.05)。结论依托咪酯可抑制胃癌细胞的增殖、侵袭和迁移,其可能通过调控miR-211-5p/ROBO1的表达发挥抑制胃癌细胞增殖、迁移侵袭的作用。

• 单位
  郑州大学; 第一附属医院消化内科; 河南省疾病预防控制中心; 郑州大学第五附属医院; 郑州大学第一附属医院