含MDV gB CTL表位与鸡HSP108融和蛋白基因的构建及原核表达

作者：邱亚峰; 葛菲菲; 曹瑞兵; 周斌; 马志永; 陈溥言

来源：西北农林科技大学学报(自然科学版), 2009, (05): 1-6.

• CTL表位
• 原核表达
• 融合蛋白基因
• 热休克蛋白 CTL epitope
• prokaryotic expression
• fusiong protein gene
• heat shock protein

【目的】为新型马立克氏病(MD)疫苗的开发奠定基础。【方法】以SPF鸡肝脏中提取RNA为模板,利用RT-PCR反应扩增鸡HSP108基因;利用PCR方法扩增MDV gB CTL表位基因,并将MDV gB CTL表位基因与鸡HSP108融合在一起,构建融合蛋白基因rgBHSP108,将该融合蛋白基因克隆入原核表达载体pET-28a中,构建重组表达载体pET-gBHSP108,将该重组载体转化E.coliBL21(DE3),并用IPTG诱导融合蛋白rgBHSP108的表达,对rgBHSP108进行SDS-PAGE电泳、可溶性分析、蛋白纯化及Western-blot分析。【结果】扩增到鸡2.4kb的...

• 单位
  中国农业科学院上海兽医研究所; 上海市动物疫病预防控制中心; 南京农业大学