高病毒含量PEDV的纯化及培养条件的优化研究

作者：李少丽; 王家福; 张春阳; 尹忠良^*

来源：黑龙江畜牧兽医, 2022, (19): 121-124.

DOI：10.13881/j.cnki.hljxmsy.2021.09.0190

• 猪流行性腹泻病毒
• 蚀斑
• 纯化
• 培养
• 病毒含量

为了提高猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)的病毒含量并优化PEDV培养条件，试验采用病毒蚀斑纯化的方法，连续进行3代蚀斑纯化和增殖培养PEDV,并对纯化增殖的病毒进行PCR鉴定。以第3代增殖的PEDV为种毒，探讨PEDV在Vero细胞上增殖的最佳接毒剂量、吸附时间和弃液比例等。结果表明：经3代蚀斑纯化后，PEDV S基因序列未发生突变，并且PEDV含量比纯化前提高约35倍。PEDV在Vero细胞上的最佳接毒比例为0.01%,最佳吸附时间为2 h,最佳弃液比例为1/2,应用最佳培养条件培养的PEDV含量最高可达1×107.50 TCID50/mL。说明通过病毒蚀斑纯化的方法可以培养高病毒含量的PEDV,为高抗原含量猪流行性腹泻疫苗的生产提供良好的种毒资源。