摘要
为探析大豆斑疹病菌(Xanthomonas axonopodis pv.glycines,Xag)基因组中唯一注释编码内切甘露聚糖酶(mannan endo-1,4-β-mannosidase, ManA)基因是否参与Xag的内切甘露聚糖酶活性及其他功能,采用同源重组策略创制了Xag的manA基因缺失突变株(ΔmanA),并对该突变株进行功能分析.结果表明:相对于野生型,该突变株的胞外纤维素酶活性和内切甘露聚糖酶活性均显著增强,而且能形成明显的胶状物;功能互补使ΔmanA的上述3种表型均恢复至野生型水平;manA基因突变不影响菌株的生物膜形成、胞外多糖合成及蛋白酶和淀粉酶活性;负责胞外纤维素酶合成的egl2和engXCA基因也共同控制Xag的内切甘露聚糖酶活性;荧光定量PCR结果显示,ManA涉及负调控egl2和engXCA基因的表达.总之,manA基因突变导致egl2和engXCA基因的表达水平上调,从而增强菌株的内切甘露聚糖酶活性.研究为深度解析植物病原黄单胞菌Ⅱ型分泌系统胞外酶类的生物学特性提供了科学线索.
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单位浙江师范大学; 生命科学学院