ID-LC-MS/MS检测L-色氨酸及其代谢物的方法建立及方法学评价

作者：戴鑫华; 范飞; 蒙立业; 李壹; 安云飞; 邹远高; 张蕾; 白杨娟^*

来源：中华检验医学杂志, 2023, 46(08).

• 串联质谱法
• L-色氨酸
• L-犬尿氨酸
• 犬尿喹啉酸

目的建立同位素稀释液相色谱串联质谱(ID-LC-MS/MS)方法检测血清中L-色氨酸及其代谢物。方法方法学建立及评价。收集2022年11月至2023年1月的华西医院166例健康体检者的血清样本。采用L-色氨酸(Trp)、L-犬尿氨酸(Kyn)和犬尿喹啉酸(KA)的同位素标记物为内标, 通过蛋白沉淀处理血清样本, 应用LC-MS/MS同时检测Trp、Kyn和KA含量。评价该方法的选择性、特异性、线性、检出限(LOD)、定量限(LOQ)、携带污染、精密度、加标回收率、基质效应和稀释一致性。结果 Trp、Kyn和KA的线性相关系数均>0.999, LOD分别为0.10 μmol/L、0.01 μmol/L和1.00 nmol/L, LOQ分别为0.20 μmol/L、0.04 μmol/L和2.00 nmol/L, 批内精密度和批间精密度均<10%, 平均加标回收率与相对基质效应均在100%左右, 超线性范围的样本最多可稀释16倍。健康体检者血清中Trp、Kyn、KA含量、Kyn/Trp和KA/Kyn比值分别为(59.55±10.92)μmol/L、(1.85±0.43)μmol/L、(39.89±17.93)nmol/L、(31.64±8.19)×10-3和21.51±6.72。结论建立了基于ID-LC-MS/MS定量检测Trp、Kyn和KA的方法, 该方法简便快捷、灵敏度高、结果准确可靠, 为临床相关研究提供了可靠支撑。

• 单位
  四川大学华西医院; 四川大学