TBHQ对鸡舍PM2.5诱导鸡胚肺组织细胞焦亡、坏死和炎症损伤的影响

作者：郗蒙雪; 沈丹; 石一凡; 李春梅^*

来源：中国农业科学, 2023, 56(04): 779-787.

• TBHQ
• 细胞焦亡
• 细胞程序性坏死
• 细颗粒物
• 鸡胚
• 氧化应激

【目的】探讨特丁基对苯二酚(tert-Butylhydroquinone,TBHQ)对鸡舍细颗粒物(fine particulate matter,PM2.5)诱导鸡胚肺损伤的缓解作用及机制，为预防和缓解鸡舍PM2.5污染引起的鸡呼吸道健康问题提供理论依据。【方法】选用14日龄鸡胚作为研究对象，首先建立鸡舍PM2.5诱导鸡胚肺组织损伤模型，再利用鸡胚肺损伤模型研究TBHQ的缓解作用。在建立鸡舍PM2.5诱导鸡胚肺组织损伤模型试验中，选取不同浓度的PM2.5(0、0.25、0.5、1 mg·mL-1)在14日龄鸡胚卵白处注射，5 d后，观察鸡胚存活率以及鸡胚肺组织形态，选取合适的PM2.5处理浓度(0.25 mg·mL-1)，建立鸡胚肺损伤模型。在TBHQ对PM2.5诱导鸡胚肺损伤的影响试验中，将14日龄鸡胚分为对照组(生理盐水)、PM2.5组(0.25 mg·mL-1 PM2.5)、TBHQ组(0.1μg·mL-1 TBHQ)、PM2.5+TBHQ组(0.25 mg·mL-1 PM2.5+0.1μg·mL-1 TBHQ)，分别注入鸡胚卵白处，试验持续5 d，采集肺组织，记录种蛋重量、胚胎重量以及肺组织重量；对鸡胚肺脏进行组织学观察；检测肺组织丙二醛(malondialdehyde,MDA)、总超氧化物歧化酶(total superoxide dismutase,T-SOD)、总抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC)和细胞焦亡(NLRP3、Caspase-1、IL-18、IL-1β)以及细胞程序性坏死(RIPK1、RIPK3、MLKL)相关基因的表达。【结果】在建立鸡舍PM2.5诱导鸡胚肺组织损伤模型试验中，不同浓度的PM2.5(0、0.25、0.5、1 mg·mL-1)对鸡胚存活率无显著影响，但0.25mg·mL-1 PM2.5组鸡胚肺组织出现炎性细胞浸润现象，0.5 mg·mL-1和1 mg·mL-1 PM2.5组鸡胚肺组织出现肺水肿现象，表明随着PM2.5浓度增加，鸡胚肺部炎症损伤加重。在TBHQ对PM2.5诱导鸡胚肺损伤的缓解试验中，各组对鸡胚胚胎重量、肺脏重量、胚蛋比和肺胚比均无影响；与PM2.5组相比，TBHQ和PM2.5共处理组的鸡胚肺组织中炎性细胞浸润现象明显减少，MDA水平下降；RT-PCR结果显示：与对照组相比，TBHQ组Caspase-1的表达显著上升(P<0.01),PM2.5组IL-1β(P<0.01)、RIPK1(P<0.01)的表达显著上升；与PM2.5组相比，TBHQ和PM2.5共处理组IL-18(P<0.01)、IL-1β(P<0.01)、RIPK1(P<0.01)、MLKL(P<0.01)的表达显著下调，Caspase-1(P<0.01)、RIPK3(P<0.05)的表达显著上升。【结论】TBHQ能够通过抑制氧化应激，降低细胞焦亡和细胞程序性坏死相关基因的表达，缓解鸡舍PM2.5引起的鸡胚肺组织炎症损伤。

• 单位
  南京农业大学; 动物科技学院