摘要
目的 探究香叶木素对A549细胞增殖、干细胞特性的影响及其机制。方法 MTT法检测不同浓度香叶木素对细胞活性的作用,随后将A549细胞分为对照组、香叶木素低、中、高剂量组和顺铂处理组。集落形成实验检测A549细胞增殖;成球实验检测成球直径和成球数量;流式细胞术检测肿瘤干细胞标记物CD133的表达,定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)和Western bolt分别检测CD44、SOX2、乙醛脱氢酶1(ALDH1)、OCT4、Wnt、β-catenin和GSK-3β的mRNA和蛋白相对表达量。建立异种移植瘤模型,免疫组化检测CD44和SOX2的表达,Western blot检测β-catenin蛋白表达量。结果 与对照组相比,中、高剂量香叶木素处理后,A549细胞活力和克隆形成率降低,干细胞成球直径和成球数量降低,CD133阳性细胞率减少,CD44、SOX2、ALDH1、OCT4、Wnt和β-catenin的mRNA和蛋白相对表达量降低,GSK-3β的mRNA和蛋白相对表达量升高,GSK-3β蛋白磷酸化水平降低。在体内,香叶木素处理组的肿瘤重量减轻,肿瘤组织中CD44和SOX2阳性细胞数均减少,β-catenin蛋白表达量下调。结论 香叶木素可能通过抑制Wnt/β-catenin途径抑制A549细胞增殖及干细胞活性。
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单位河南省胸科医院