摘要
目的探讨黄芩素对人乳腺癌MDA-MB-231细胞侵袭、转移的影响及相关分子机制。方法将对数生长期MDA-MB-231细胞随机分为对照组和20、40、80、160μmol·L-1黄芩素处理组,分别给予0、20、40、80、160μmol·L-1黄芩素干预;采用划痕愈合实验检测各组MDA-MB-231细胞的转移能力,Transwell小室实验检测各组MDA-MB-231细胞的侵袭能力,蛋白质印迹法检测各组细胞中上皮型钙黏蛋白(CDH1)、蜗牛家族转录抑制因子(SNAIL)、波形蛋白(vimentin)的相对表达量,实时荧光定量聚合酶链式反应检测各组MDA-MB-231细胞中转移相关肺腺癌转录本1(MALAT1)mRNA相对表达量。采用聚合酶链式反应及pcDNA3.1载体构建MALAT1过表达载体,转染至对数生长期MDA-MB-231细胞,将pcDNA3.1-MALAT1过表达MDA-MB-231细胞随机分为对照组和20、40、80、160μmol·L-1黄芩素处理组,分别给予0、20、40、80、160μmol·L-1黄芩素干预,使用蛋白质印迹法检测各组细胞中CDH1、SNAIL、vimentin蛋白相对表达量。结果 20、40μmol·L-1黄芩素处理组与对照组细胞转移率、侵袭率比较差异无统计学意义(P>0.05);80、160μmol·L-1黄芩素处理组细胞转移率、侵袭率低于对照组(P<0.05)。80、160μmol·L-1黄芩素处理组细胞转移率低于20μmol·L-1黄芩素处理组(P<0.05),160μmol·L-1黄芩素处理组细胞转移率低于80μmol·L-1黄芩素处理组(P<0.05);其余各剂量组之间细胞转移率比较差异无统计学意义(P>0.05)。160μmol·L-1黄芩素处理组细胞侵袭率低于20、40μmol·L-1黄芩素处理组(P<0.05);其余各剂量黄芩素处理组之间细胞侵袭率比较差异无统计学意义(P>0.05)。20μmol·L-1黄芩素处理组细胞中CDH1、vimentin和SNAIL蛋白相对表达量与对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05);40μmol·L-1黄芩素处理组细胞中SNAIL蛋白相对表达量低于对照组(P<0.05),CDH1和vimentin蛋白相对表达量与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);80、160μmol·L-1黄芩素处理组细胞中CDH1蛋白相对表达量高于对照组和20μmol·L-1黄芩素处理组(P<0.05),vimentin和SNAIL蛋白相对表达量低于对照组和20μmol·L-1黄芩素处理组(P<0.05);160μmol·L-1黄芩素处理组细胞中CDH1蛋白相对表达量高于40μmol·L-1黄芩素处理组(P<0.05),vimentin和SNAIL蛋白相对表达量低于40μmol·L-1黄芩素处理组(P<0.05);其余各剂量黄芩素处理组细胞中CDH1、vimentin和SNAIL蛋白相对表达量比较差异均无统计学意义(P>0.05)。20、40、80、160μmol·L-1黄芩素处理组细胞中MALAT1 mRNA相对表达量低于对照组(P<0.05);80、160μmol·L-1黄芩素处理组细胞中MALAT1 mRNA相对表达量低于20μmol·L-1黄芩素处理组(P<0.05),160μmol·L-1黄芩素处理组细胞中MALAT1 mRNA相对表达量低于40μmol·L-1黄芩素处理组(P<0.05);其余各剂量黄芩素处理组细胞中MALAT1 mRNA相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05)。pcDNA3.1-MALAT1过表达MDA-MB-231细胞中MALAT1相对表达量高于空载体MDA-MB-23细胞(P<0.05)。20、40、80、160μmol·L-1黄芩素处理组pcDNA3.1-MALAT1过表达MDA-MB-231细胞中CDH1、vimentin和SNAIL蛋白相对表达量与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论黄芩素可通过抑制MALAT1的表达而抑制MDA-MB-231细胞的上皮-间质转化过程,进而抑制细胞侵袭和转移能力。
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单位郑州市第一人民医院