混合离子对试剂体系下寡核苷酸的IP-RPLC保留行为

作者：乔俊琴; 梁超; 曹兆明; 练鸿振^*

来源：高等学校化学学报, 2018, 39(09): 1893-1903.

• 离子对反相液相色谱(IP-RPLC)
• 寡核苷酸
• 混合离子对试剂
• 保留行为
• 保留机理

利用离子对反相液相色谱(IP-RPLC)对寡核苷酸在混合离子对试剂三乙胺/丙胺-乙酸盐(TEA/PAAA)体系下的保留行为进行了研究,并与经典离子对试剂三乙胺乙酸盐(TEAA)体系下的保留行为进行了对比.实验结果表明,相同离子对试剂浓度下,寡核苷酸在TEA/PA-AA体系下的保留均弱于TEAA体系下的保留,且寡核苷酸的保留均随着离子对试剂浓度(20120 mmol/L)的增加而增强.同型寡核苷酸(dC)n作为特例,当n>10时,保留基本趋于稳定,这是由于(dC)n随着离子对试剂浓度的增加保留增长较快,在较低的离子对试剂浓度下即可达到最大保留.同时发现,短链同型寡核苷酸(dT)n和异型寡核苷酸在TEA/PA-AA体系下的分离均优于TEAA体系,而同型寡核苷酸(dA)n和(dC)n的分离则在TEAA体系下更优.通过研究流动相中离子对试剂总浓度cp与寡核苷酸保留因子k之间的关系,推断出2种体系下寡核苷酸的保留机理均以离子对模型占主导地位.总体而言,分离相同长度的异型寡核苷酸时,TEA/PA-AA混合离子对体系尤其在中等离子对浓度下比TEAA体系具有明显优势,低的离子对试剂浓度可增加与后续电喷雾质谱(ESIMS)的兼容性,有利于寡核苷酸的定性分析.

• 单位
  南京大学; 化学化工学院; 生命分析化学国家重点实验室