维生素D受体特异性siRNA表达载体的构建

作者:向伟; 何小解; 马燕琳; 易著文; 郑维; 曹艳; 赵水平; 马志超; 吴明; 符生苗; 马建林; 王洁; 康红
来源:中国热带医学, 2011, (05): 521-524.
DOI:10.13604/j.cnki.46-1064/r.2011.05.014

摘要

目的通过构建维生素D受体(VDR)基因特异性siRNA(small interfering RNA)真核表达载体,检测其对血管内皮细胞(EC)中VDR基因的沉默作用,为进一步探讨VDR与心血管疾病发生发展关系的研究奠定基础。方法构建小鼠VDR特异性siRNA表达载体并测序,进行人EC/鼠EC的培养,进行siRNA转染试验,倒置荧光显微镜下观察细胞转染效率,Western blot进行鉴定。结果针对VDR基因的4个不同位点,设计、构建了4个siRNA干扰载体,经测序,序列全部正确。成功完成了人EC/鼠EC的培养及转染,荧光显微镜观察发现转染的重组质粒在EC内出现不同的转染效率,1号质粒的转染效率...

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