Ⅳ型戊型肝炎病毒ORF3蛋白在人肝细胞中相互作用蛋白的筛选与鉴定

作者：郭亮; 傅艳琨; 吴更; 崔立; 华修国

来源：上海交通大学学报(农业科学版), 2013, (04): 83-87.

• 戊型肝炎病毒
• ORF3
• 免疫共沉淀
• 质谱
• RPS18 hepatitis E virus
• Co-immunoprecipitation
• mass spectrometry
• RPS18

戊型肝炎病毒编码3个开放性阅读框:ORF1,ORF2和ORF3,其中ORF3蛋白的功能目前尚不明确。为了进一步了解其功能,研究构建了ORF3哺乳动物表达载体pcDNA3.1Flag-ORF3,利用免疫共沉淀和LC/MS的方法筛选并鉴定肝细胞中可以和ORF3蛋白相互作用的蛋白。结果显示,成功构建了Ⅳ型戊型肝炎ORF3的重组表达载体,并利用免疫印迹检测其可以在哺乳动物细胞中正常表达ORF3蛋白,在肝癌细胞株HepG2中筛选并鉴定到了7个可能和ORF3相互用的蛋白,并推测其中RPS18的可能性较大,进而推测HEV可能通过ORF3与核糖体直接相互作用,从而影响其所感染的细胞中蛋白的正常翻译过程。本研究...

• 单位
  上海交通大学; 微生物代谢国家重点实验室