猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒和乙型脑炎病毒多重RT-PCR检测方法的建立

作者：刘辉; 熊金凤; 邹浩勇; 陈杨; 杨维红; 何启盖

来源：华中农业大学学报, 2008, (01): 12-18.

DOI：10.13300/j.cnki.hnlkxb.2008.01.028

• 多重RT-PCR
• 猪瘟病毒
• 猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒
• 乙型脑炎病毒 multiplex RT-PCR
• classical swine fever virus
• porcine reproductive and respiratory syndrome virus
• Japanese encephalitis virus

根据猪瘟病毒(CSFV)的E2基因保守序列、猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)的ORF7基因及部分ORF6和3-UTR基因序列和猪乙型脑炎病毒(JEV)的E基因保守序列,设计了3对引物,扩增大小分别为288 bp4、30 bp和1 015 bp目的片段。以纯培养病毒抽提RNA,制备cDNA模板,利用3对引物,通过条件的优化,建立了同时检测这3种病毒的多重RT-PCR。CSFV、PRRSV和JEV的RNA最小检出量分别为0.270 ng、0.049 ng、0.067 ng,其它的RNA病毒如TGEV以及DNA病毒如PPV、PrV、PCV-2检测结果为阴性。以-βactin为对照,利用本方法...

• 单位
  农业微生物学国家重点实验室