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摘要
目的了解体外转录法合成的小干扰 RNA(siRNA)沉默 MAT1基因对胰腺癌的体内体外抗癌效应。方法用 siPORT-脂质体(lipid)中性阳离子脂质体转染由体外转录法合成、Cy3荧光标记的双链 siRNA 人胰腺癌 BxPC3细胞,观察对胰腺癌细胞生长和细胞周期曲线的影响,检测 MAT1基因被 siRNA 沉默后 mRNA 和蛋白质的表达水平。在裸鼠胰腺癌皮下移植瘤瘤体内直接注射 siRNA观察抑瘤效应。结果合成的4条 MAT1-siRNA 序列中有一半可显著抑制 BxPC3细胞的生长。体外转染 MAT1-siRNA 72 h 后,BxPC3细胞生长抑制率达34.9%(P<0.01);83.9%的 BxPC3细胞滞留于G_0/G_1期,而空白对照组仅59.86%(P<0.01)。体外转染 MAT1-siRNA 48 h 后 MAT1-mRNA 水平下调了80.12%,72 h 后 MAT1蛋白质水平下调了50.12%,与各对照组相比差异均有统计学意义(均 P<0.01)。MAT1-siRNA 注射组裸鼠移植瘤重量和体积均明显低于对照组(均 P<0.05),抑瘤率达42.53%。结论 siRNA 介导的 MAT1基因沉默在体外实验中显著抑制了胰腺癌细胞的生长,在体内实验中对裸鼠胰腺癌皮下移植瘤产生明显的抑瘤效应。
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