Transwell培养体系中人AGM区基质细胞支持脐血CD34~+细胞造血

作者：张绪超; 陈惠芹; 黄绍良; 吴燕峰; 包蓉; 吴北燕; 周敦华

来源：中山大学学报(医学科学版), 2005, (02): 231-235+239.

DOI：10.3321/j.issn:1672-3554.2005.02.028

• Transwell
• 主动脉-性腺-中肾
• 基质细胞
• CD34+细胞

【目的】探讨Transwell系统中人胚主动脉-性腺-中肾(AGM)区基质细胞对脐带血造血干/祖细胞的造血能力长期维持及扩增的作用。【方法】采用免疫磁珠方法分离人脐带血CD34+细胞,接种于底层铺有人AGM区基质细胞的Transwell培养板的Inserts中,非接触共培养7-35 d,每星期取样检测细胞总数,用半同体培养基分析CFU-C及HPP-CFU集落形成数,流式细胞术检测CD34+、CD34+CD38-细胞百分率。【结果】在Transwell中非接触共培养条件下,人AGM区基质细胞培养体系较胚胎躯干基质细胞和无饲养层培养体系对有核细胞总数、CFC和CD34+细胞均具有明显的扩增作用,共培养14 d的CD34+、CD34+CD38-造血干/祖细胞均获得峰值扩增(2.62±0.8和2.15±1.04,P<0.05),而MNC总数和CFC均在21 d获得最大扩增(32.5±4.3和4.2±0.6倍,P<0.05).克隆分析发现CFU-Mix、CFU-GM、BFU-E在共培养4-5星期后均仍然可见。原始祖细胞HPP-CFC在3星期也得到2.23倍的扩增,较空白及hFT对照组均有显著性差异(P<0.05),并在共培养35 d 后仍可见HPP-CFU集落形成。【结论】人AGM区基质细胞hAGM-S3/hAGM-S4均具有造血支持作用,在非接触共培养条件下中可长期维持脐血中造血干/祖细胞的多系造血能力和高增殖潜能达21～35 d,对脐血CD34+/ CD34+CD38-细胞数也有一定程度的

• 单位
  中山大学