睾丸和卵巢打点注射pIRES2-EGFP质粒生产转基因兔的研究(英文)

作者：宋天增; 冯静; 曾宪垠; 杨剑波; 杨华; 张红琳; 杨井泉; 韩猛立; 贾斌; 赵宗胜; 石国庆

来源：西南农业学报, 2010, (06): 2059-2065.

DOI：10.16213/j.cnki.scjas.2010.06.082

• 打点注射
• 睾丸注射
• 卵巢注射
• 转基因兔 Multi-point injection
• Injection to testis
• Injection to ovary
• Transgenic rabbit

为探讨直接用注射器对睾丸和卵巢打点注射pIRES2-EGFP质粒转染兔的精子细胞和卵母细胞,建立操作方便、效率高、成本低、可批量生产转基因兔的可行性。选择5只成年新西兰雄兔、29只经产新西兰雌兔,每侧睾丸和卵巢内分别打点注射0.5~0.8 mg/mL质粒0.25 mL。①第3周随机取一只雄兔睾丸做冰冻切片,于荧光显微镜下观察转染情况。②(Ⅰ:1#♂×7♀、Ⅱ:2#♂×7♀、Ⅲ:3#♂×7♀、Ⅳ:4#♂×7♀)其它雄兔于第6周和第7周与3日前做过卵巢注射并超排处理的雌兔配种,最后采集新生仔兔耳组织,提取基因组DNA,经PCR和Southern杂交检测阳性率。结果显示雄兔睾丸冰冻切片于荧光显微镜下...

• 单位
  南京晓庄学院; 甘孜藏族自治州畜牧业科学研究所; 石河子大学; 四川农业大学; 新疆农垦科学院畜牧兽医研究所