利用柞蚕核型多角体病毒表达载体系统在柞蚕蛹中表达增强型绿色荧光蛋白

作者：王林美; 张波; 叶博; 赵振军; 李树英; 李文利; 岳冬梅; 范琦

来源：蚕业科学, 2010, (05): 792-799.

DOI：10.13441/j.cnki.cykx.2010.05.004

• 柞蚕蛹
• 核型多角体病毒表达载体系统
• 增强型绿色荧光蛋白基因
• 樗蚕培养细胞 Antheraea pernyi pupa
• Nucleopolyhedrovirus expression vector system
• Enhanced green fluorescent protein (EGFP) gene
• Cultured Philosamia cynthia cells

为了探讨外源蛋白在柞蚕蛹-柞蚕核型多角体病毒(ApNPV)表达系统的表达水平和稳定性,将增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因克隆到柞蚕核型多角体病毒转移表达载体pApM748BE中,获得重组质粒DNA,与ApNPV DNA共转染樗蚕(Phi-losamia cynthiam)培养细胞Pc-01后,用末端稀释法筛选获得重组病毒ApNPV-Δph/egfp 。将该重组病毒感染柞蚕蛹,采用SDS-PAGE和Western blot方法检测EGFP在柞蚕蛹中的表达,结果显示:在柞蚕蛹感染重组病毒ApNPV-Δph/egfp 后6 d,EG-FP就有明显的表达;感染后12～18 d,蛹体液中的EGFP含量...

• 单位
  辽宁省农业科学院大连生物技术研究所