摘要
研究旨在确定犬羊膜有效成分及中短期保存的最佳条件,通过剖腹产方式收集健康犬新鲜羊膜,分别采用不同的研磨方式(常温研磨、低温研磨、干燥研磨)和保存方式(DMEM研磨、DMEM湿重、冻干粉)处理羊膜,之后采用ELISA试剂盒检测犬羊膜上清液中碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、基质金属蛋白酶抑制因子-1 (TIMP)、肝细胞生长(HGF)、转化生长因子-β1 (TGF-β1)含量,采用BCA法测定羊膜上清液中蛋白含量。结果显示:低温研磨组(D组) b FGF、TIMP、HGF、TGF-β1含量为73.58 ng/L、22.65μg/L、46.12 ng/L、108.22μg/L,均显著高于干燥研磨组(G组)(P<0.05)。第20 d时,在4℃和-18℃条件下,冻干粉组bFGF含量显著低于其他两组(P<0.05),HGF含量极显著低于其他两组(P<0.01)。第40 d时,在4℃及-18℃条件下,冻干粉组bFGF含量极显著高于其他两组(P<0.01);-18℃条件下,冻干粉组TIMP含量显著高于其他两组(P<0.05)。第80 d时,4℃和-18℃条件下,冻干粉组bFGF、TIMP含量极显著高于其他两组(P<0.01);-18℃条件下,冻干粉组TIMP含量极显著高于其他两组(P<0.01)。-18℃条件下,第80 d时冻干粉组犬羊膜上清液中bFGF含量显著高于4℃(P<0.05),第40 d时TGF-β1含量显著高于4℃(P<0.05)。研究表明,犬羊膜存在一定含量的蛋白成分,也存在bFGF、TIMP和TGF-β1等具备生物学活性的有效成分;添加DMEM保存液成分的羊膜制品适合短期保存,冻干粉剂型适合中期保存,低温冷冻(-18℃)可有效延缓相关有效成分的降解。
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单位黑龙江省农业科学院; 黑龙江农业职业技术学院