摘要

目的探讨羌活醇对异丙肾上腺素(ISO)诱导大鼠H9c2心肌细胞损伤的保护作用及机制。方法体外无菌培养大鼠H9c2心肌细胞,利用ISO(30 mol·L-1,48 h)建立心肌细胞损伤模型。将细胞分为5组:空白对照组(正常培养的心肌细胞)、模型组(ISO组)和低、中、高3个剂量实验组(10,20和40 mol·L-1羌活醇)。用噻唑蓝法测定细胞活力,用试剂盒法检测乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)水平,膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶双染法和流式细胞术检测细胞凋亡率,蛋白质印迹法测定B淋巴细胞瘤-2蛋白(Bcl-2)、 Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)和蛋白激酶B(Akt)磷酸化蛋白的相对表达水平。结果空白对照组、模型组和低、中、高3个剂量实验组的细胞存活率分别为(100.00±2.00)%,(66.51±1.50)%,(69.96±3.43)%,(85.54±0.73)%和(87.60±1.22)%;这5组的LDH释放量分别为(159.60±7.11),(238.33±8.39),(182.95±8.66),(167.30±7.88)和(155.80±7.35) U·L-1;这5组的SOD酶活性分别为(33.90±1.57),(18.63±0.84),(67.46±3.13),(77.29±3.59)和(86.45±8.64) U·mL-1;这5组的MDA含量分别为(1.02±0.44),(1.17±0.03),(0.82±0.03),(0.78±0.01)和(0.73±0.01) nmol·mL-1 ;这5组的细胞凋亡率分别为(7.80±0.62)%,(23.70±1.41)%,(18.27±0.40)%,(16.27±0.35)%和(14.90±1.22)%;这5组的Bcl-2蛋白相对表达量分别为1.00±0.04,0.71±0.03,1.26±0.05,1.30±0.06和1.53±0.07;这5组的Bax蛋白相对表达量分别为1.00±0.05,1.30±0.06,1.21±0.03,1.15±0.03和1.10±0.03;这5组的Caspase 3蛋白相对表达量分别为1.00±0.03,1.10±0.04,0.73±0.07,0.97±0.03和1.04±0.02;这5组的p-Akt蛋白相对表达量分别为1.00±0.06,0.81±0.04,1.22±0.02,1.01±0.05和0.84±0.04。上述指标:模型组与空白对照组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05);实验组与模型组相比,除高剂量Caspase 3和Akt磷酸化蛋白相对表达量外,差异均具有统计学意义(均P<0.05)。结论体外培养条件下羌活醇可能对ISO诱导的H9c2心肌细胞损伤具有一定的保护作用,其保护作用机制可能与增强抗氧化酶的活性、抗凋亡有关。

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