小麦TaUBC基因泛素结合酶活性分析

作者：张祥云; 赵思语; 温潇; 王宁; 郭彦; 赵庆臻^*

来源：聊城大学学报(自然科学版), 2018, 31(03): 79-85.

DOI：10.19728/j.issn1672-6634.2018.03.012

• TaUBC
• 泛素结合酶
• 点突变
• 体外泛素化反应

已报道的RNA水平研究表明TaUBC可能是小麦产量相关基因,生物信息学分析显示该基因属于泛素结合酶家族.荧光定量PCR显示TaUBC在小麦根茎叶中均有表达.为了验证TaUBC蛋白是否具有泛素结合酶活性,本文利用原核系统表达野生型TaUBC及三种点突变TaUBCC21S、TaUBCC85S、TaUBCC107S蛋白,并对这些蛋白进行体外泛素化活性分析.结果证实TaUBC是一个有活性的泛素结合酶.另外,点突变C85S使得TaUBC丧失E2活性,C21S和C107S则对活性没有影响,证明其UBC结构域中第85位Cys是结合泛素的关键作用位点.

• 单位
  生命科学学院; 聊城大学