谷胱甘肽过氧化物酶4对结直肠癌细胞系SW480瑞格菲尼抵抗的影响及机制研究

作者：张波; 霍明东; 马俊; 夏国豪^*

来源：中国临床药理学杂志, 2020, 36(06): 647-654.

DOI：10.13699/j.cnki.1001-6821.2020.06.015

• 瑞格菲尼
• 结直肠癌
• 谷胱甘肽过氧化物酶4
• 上皮间充质转化

目的探究谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)的表达与结直肠癌细胞瑞格菲尼抵抗的关系。方法转染siControl于敏感及耐药细胞中,并作为对照组及实验组;分别转染2组不同的GPX4 siRNA载体于耐药细胞,并作为转染Ⅰ组和转染Ⅱ组。用MTS细胞增殖活性实验检测细胞瑞格菲尼半抑制浓度(IC50),用实时荧光定量聚合酶链反应及蛋白质印迹法检测GPX4、蛋白激酶B(Akt)及上皮间充质转化(EMT)相关分子E-钙黏蛋白(E-cadherin)及波形蛋白(Vimentin)mRNA及蛋白的表达,用免疫共沉淀实验(Co-IP)检测GPX4与Akt的相互结合。结果对照组、实验组、转染Ⅰ组和转染Ⅱ组瑞格菲尼IC50分别为(0.39±0.04),(1.74±0.15),(1.03±0.08)和(0.99±0.09)μmol·L-1,GPX4 mRNA表达分别为(1.00±0.06),(4.34±0.21),(0.53±0.04)和(0.47±0.05),Akt mRNA表达分别为(1.00±0.11),(3.83±0.26),(3.64±0.34)和(3.94±0.33),E-cadherin mRNA表达分别为(1.00±0.06),(0.27±0.02),(0.55±0.04)和(0.61±0.04),Vimentin mRNA表达分别为(1.00±0.07),(7.15±0.62),(4.57±0.53)和(4.43±0.56),GPX4蛋白表达分别为(0.37±0.04),(0.71±0.06),(0.14±0.01)和(0.19±0.01),p-Akt蛋白表达分别为(0.13±0.01),(0.77±0.08),(0.20±0.01)和(0.22±0.01),E-cadherin蛋白表达分别为(0.85±0.01),(0.16±0.01),(0.49±0.01)和(0.44±0.01),Vimentin蛋白表达分别为(0.06±0.01),(0.37±0.04),(0.27±0.02)和(0.25±0.02),实验组的上述指标与对照组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05),转染Ⅰ组和转染Ⅱ组的上述指标(除Akt mRNA外)与实验组比较,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。Anti-GPX4与Anti-IgG的p-Akt蛋白灰度分别为(0.49±0.05)和(0.03±0.01),差异有统计学意义(P<0.05)。结论 GPX4可促进结直肠癌细胞Akt磷酸化水平及细胞EMT,并介导瑞格菲尼抵抗的形成。

• 单位
  宁夏医科大学总医院; 东南大学附属中大医院