体外不同压力对视网膜Müller细胞的GLAST表达的影响

作者：韩芳芳; 陈晓敏; 柯敏; 王越

来源：武汉大学学报(医学版), 2016, 37(03): 386-389.

DOI：10.14188/j.1671-8852.2016.03.010

• 压力
• 视网膜Müller细胞
• 青光眼视神经病变
• GLAST

目的:研究不同压力对体外培养的视网膜Müller细胞形态、活性和L-谷氨酸/L-天门冬氨酸转运体(GLAST)表达的影响。方法:按不同压力将Sprague Dawley大鼠Müller细胞第4代细胞随机分为5组,其中对照组为A组(+0mmHg),实验组分别为B组(+15mmHg)、C组(+30mmHg)、D组(+45mmHg)、E组(+60mmHg),每组3瓶,37℃,5%CO2培养箱培养2h。倒置显微镜观察Müller细胞形态;噻唑蓝比色法(MTT)测定波长570nm处的吸光度(A)值,以各组A值计算细胞相对存活率;免疫蛋白印迹法(Western blot)检测各组大鼠视网膜Müller细胞上GLAST的蛋白表达。结果:光镜下,与对照组相比,体外培养的视网膜Müller细胞经不同压力处理下形态改变不明显。MTT检测显示,A、B、C、D、E组A值分别为1.676 3±0.054 7、1.503 3±0.053 6、1.209 3±0.045 5、1.020 0±0.040 0、0.706 3±0.034 1,细胞相对存活率分别为100%、89.3%、71.3%、59.7%、40.3%。其中,B、C、D、E组A值均较A组降低(P<0.05)。随着压力的升高,细胞相对存活率逐渐降低,各组间总体差异均有统计学意义(P<0.05);Western blot检测显示,与A组相比,其余各组的大鼠视网膜Müller细胞的GLAST蛋白表达均下降,差异有统计学意义(P<0.05)。大鼠视网膜Müller细胞上GLAST的蛋白表达随着压力的升高逐渐降低,各组间总体差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:压力直接影响体外培养的Müller细胞存活状况。随压力升高,大鼠视网膜Müller细胞存活率下降,且细胞上的GLAST的蛋白表达下降。

• 单位
  武汉大学中南医院