宿主因子CD63对人轮状病毒SA11体外复制的影响

作者：郑春红; 于漫; 李香雨; 聂梓陶; 赵微^*

来源：现代预防医学, 2020, 47(12): 2233-2245.

• CD63蛋白
• 轮状病毒
• 病毒复制

目的测定轮状病毒2种宿主细胞内CD63的高低表达对病毒体外复制的影响,为探究轮状病毒与宿主因子CD63的相互作用机制奠定基础。方法构建CD63沉默表达质粒sh RNA-4038、sh RNA-4041和过表达质粒pc DNA3.1(+)-CD63-flag(CD63-Flag)。质粒转染轮状病毒2种宿主细胞CV-1和MA104,采用实时定量PCR(RT-qPCR)和western blot检测CD63 mRNA和蛋白的表达,筛选CD63高表达细胞株(CD63-H)和低表达细胞株(CD63-L)。轮状病毒SA11感染CD63-L、CD63-H、正常对照细胞组(CNr)及空白对照细胞组(shNC),采用RT-qPCR、western blot检测病毒基因拷贝数和病毒蛋白表达。结果细胞转染sh RNA-4038和sh RNA-4041质粒后,CD63的表达明显抑制,其中CV-1细胞mRNA和蛋白水平抑制效率分别为69.7%和39.8%,MA104细胞mRNA和蛋白水平抑制效率分别为76.4%和49.3%;CD63-H组细胞内CD63的mRNA和蛋白表达明显增加(P<0.05)。采用滴度为8log FFU/ml的SA11病毒感染细胞后,CD63-L组病毒基因拷贝数下降32.6%(CV-1)和35.7%(MA104);病毒蛋白表达水平下降41.6%(CV-1)和44.7%(MA104);CD63-H组病毒基因拷贝数和蛋白表达水平明显增加,对照组病毒表达量无明显变化(P<0.05)。结论宿主因子CD63高表达能够促进病毒复制,而CD63抑制表达后,病毒复制明显下降。宿主因子CD63的表达与轮状病毒复制呈现正相关。

• 单位
  锦州医科大学