抗幽门螺杆菌尿素酶B纳米抗体的制备及鉴定

作者：钟引凤; 刘晓芳; 刘贝; 黄云祥; 何庆华; 李燕萍; 涂追; 刘琼; 付金衡^*

来源：南昌大学学报(理科版), 2021, 45(01): 41-47.

DOI：10.13764/j.cnki.ncdl.2021.01.008

• 幽门螺杆菌
• 噬菌体展示
• 纳米抗体
• ELISA

制备抗幽门螺杆菌(Helicobacter pylori)尿素酶B(UreB)纳米抗体。用灭活的全幽门螺杆菌免疫羊驼,以重组蛋白UreB为靶分子,从噬菌体展示文库中筛选出能与重组蛋白UreB特异性结合的纳米抗体,构建原核表达载体,IPTG诱导表达,ELISA鉴定纳米抗体特异性。获得5×10~7cfu的噬菌体文库,将筛选的两个OD_(450)值较高且序列不同的纳米抗体HU2-9和HU2-36分别进行表达SDS-PAGE鉴定均为可溶性且表达量分别为92和32 mg·L~(-1)。ELISA结果表明两个纳米抗体能特异性结合Hp菌体蛋白,并对尿素酶活性具有一定的抑制作用。成功淘选出6种独特序列的抗幽门螺杆菌UreB纳米抗体。

• 单位
  南昌大学; 基础医学院; 中德联合研究院; 生命科学学院; 南昌大学食品科学与技术国家重点实验室