LASS2通过AMPKα/mTORC1信号通路诱导HepG2肝癌细胞自噬和凋亡

作者：黎兵; 何维; 向加林; 杨艳; 杨小理^*

来源：检验医学与临床, 2022, 19(20): 2781-2785.

• 肝癌
• 自噬
• 凋亡
• 单磷酸腺苷活化蛋白激酶α
• 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物1

目的 研究LAG1长寿保障基因2(LASS2)过表达对HepG2肝癌细胞凋亡、自噬的作用及可能的信号通路。方法 采用HepG2肝癌细胞进行研究，设置空白对照组、空载组(重组腺病毒Adv-GFP感染细胞)、实验组(重组腺病毒Adv-LASS2-GFP感染细胞)。感染48 h后分别提取各组细胞总RNA和蛋白，采用实时荧光定量反转录PCR(qRT-PCR)、Western blot检测LASS2 mRNA、蛋白表达水平的变化；CCK-8实验评价各组细胞增殖能力的差异及流式细胞术检测各组细胞凋亡情况；Western blot检测各组细胞凋亡相关蛋白(BCL2、Bax)、自噬相关蛋白(SQSTM1、LC3A/B、Beclin-1)及单磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)α/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物1(mTORC1)信号通路相关蛋白(t-AMPKα、p-AMPKα、t-Raptor和p-Raptor)的表达水平。结果 与空白对照组、空载组相比，实验组LASS2 mRNA、蛋白相对表达水平均明显上调(P<0.001),且HepG2肝癌细胞增殖能力明显被抑制(P<0.001)。流式细胞仪检测结果表明过表达的LASS2促进HepG2细胞凋亡(P<0.001)。Western blot显示，实验组BCL2、SQSTM1蛋白相对表达水平较空白对照组、空载组均明显下调(P<0.001),Bax、Beclin-1、LC3A/B蛋白相对表达水平均明显上调(P<0.001),而p-AMPKα/t-AMPKα及p-Raptor/t-Raptor比值明显上调(P>0.05)。结论 过表达的LASS2可能通过调控AMPKα/mTORC1信号通路诱导HepG2肝癌细胞自噬和凋亡。

• 单位
  遵义医科大学