肺炎支原体铁吸收调节蛋白基因的克隆表达与纯化

作者：唐愈菲; 游晓星; 赵爽; 黄泽智; 李冉辉

来源：生物技术, 2016, (03): 219-223+251.

DOI：10.16519/j.cnki.1004-311x.2016.03.0039

• 肺炎支原体
• Fur蛋白
• 克隆
• 表达 Mycoplasma pneumoniae
• Fur
• cloning
• expression

[目的]克隆肺炎支原体铁吸收调节蛋白(Fur)基因并纯化Fur蛋白,为研究其生物学功能奠定基础。[方法]利用Clustal Omega分析肺炎支原体Fur蛋白及其同源序列并用MEGA6.0构建进化树,通过PCR扩增Fur基因并对其进行双酶切,然后连接到p ET28a,得到重组载体p ET28a-Fur,将其转化大肠杆菌BL21(DE3),利用IPTG诱导Fur蛋白表达,并通过亲和层析纯化Fur蛋白。[结果]多序列比对和进化树分析表明Mp含有一个Fur蛋白。克隆得到大小为477 bp的Fur基因,编码159个氨基酸。得到重组表达质粒p ET28a-Fur,该质粒能在大肠杆菌中能高效表达,并纯化得...

• 单位
  邵阳医学高等专科学校; 南华大学