摘要
目的 建立肺炎克雷伯菌肺部感染小鼠模型,探讨中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)在肺炎克雷伯菌肺部感染小鼠巨噬细胞激活过程中的调控作用。方法 提取小鼠外周血中性粒细胞,采用佛波酯(PMA)诱导中性粒细胞形成NETs;采用鼻腔滴注肺炎克雷伯菌法构建小鼠肺部感染模型,提取和培养模型小鼠肺泡巨噬细胞,将巨噬细胞分成空白组(加入等体积PBS),NETs组[加入(1.7×106个/ml)NETs];两组均刺激12 h。采用酶联免疫吸附试验检测培养液及细胞中白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平;实时定量荧光聚合酶链反应(qRT-PCR)检测NETs对巨噬细胞炎症因子mRNA转录的影响。结果 模型组小鼠血清TNF-α、IL-1β和IL-6水平均显著升高(P<0.05),提示模型组小鼠出现严重感染;与空白组比较,NETs组小鼠肺泡巨噬细胞和上清液中IL-1β、IL-6、TNF-α含量表达水平均升高(P<0.05),同时能增加巨噬细胞中TNF-α、IL-6、IL-1β mRNA转录。结论 NETs能够增加肺泡巨噬细胞炎症因子释放,放大肺炎克雷伯菌肺部感染小鼠炎症反应,提示NETs可以作为肺部感染病情生物学标志物并为预后评估和治疗提供指导。
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