摘要
目的 实现食品中植物源性成分非定向筛查技术在实际样品中的检测应用,为打击植物源性成分的掺伪掺假提供技术支撑。方法 采用改良CTAB法、SDS法和试剂盒法对多种植物源性食品基因组DNA进行提取,对获得的脱氧核糖核酸(DNA)质量、浓度和纯度进行比较。以植物中叶绿体基因组中的RbcL基因为条形码,选用30种常见植物物种对该引物进行通用性、特异性验证。将二代高通量测序与DNA条形码技术相结合,对山东省市售的4个混合植物样本进行种属鉴别。结果 改良CTAB法和试剂盒法可有效去除植物中多糖类和多酚类物质的干扰,DNA提取效果较理想,SDS法较差;CTAB法获得的DNA浓度高于试剂盒法。该方法对选用的30种植物物种通用性、特异性良好。在属和种水平下,混合样本中植物物种的同步检出率较高,种水平的物种检出率达到98%,出现非目标匹配。结论 RbcL基因片段可以作为植物种属鉴别的条形码,在属水平下的鉴别率较高,在种水平下存在高检出、低分辨率的问题,后期可以通过增加条形码长度等方法进行进一步改善,以期推进DNA宏条形码方法在植物鉴定领域的常规化应用奠定基础。
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单位山东省食品药品检验研究院; 中国食品药品检定研究院