SIRT1增强人慢性粒系白血病K562细胞耐药性

作者：毛蓓蓓; 宋崴; 吕湘; 陈厚早; 刘德培

来源：基础医学与临床, 2011, 31(11): 1223-1228.

DOI：10.16352/j.issn.1001-6325.2011.11.014

• SIRT1
• DNA损伤
• 耐药性
• K562细胞

目的研究Ⅲ类去乙酰化酶SIRT1对人慢性粒系白血病K562细胞耐药性的影响及其机制。方法分别将酶活性缺失突变型SIRT1-H363Y和SIRT1 shRNA表达质粒转染K562细胞,G418筛选稳定克隆后用H2O2和依托泊甙(et-oposide)处理细胞,Western blot检测caspase3剪切,BAX表达及DNA损伤标志物H2A.X磷酸化;在MCF-7和293A中过表达野生型SIRT1,检测H2O2和etoposide处理后的H2A.X磷酸化。结果 K562细胞中SIRT1-H363Y表达和SIRT1干扰均能促进H2 O2和etoposide诱导的caspase3剪切及BAX表达,并显著抑制H2 O2诱导的H2A.X磷酸化(对照vs SIRT1-H363Y:0.54±0.03 vs 0.23±0.01)(P<0.01)和etoposide(对照vs SIRT1 H363Y:1.36±0.20 vs 0.68±0.14)(P<0.05);(对照vs SIRT1 RNAi:0.68±0.06 vs 0.44±0.04)(P<0.01);在MCF-7和293A细胞中,野生型SIRT1过表达能明显增加etoposide诱导的H2A.X磷酸化(MCF-7:0.26±0.04 vs 0.46±0.02)(P<0.01);(293A:0 vs0.42±0.09)(P<0.05)。结论 SIRT1能保护K562细胞对抗DNA损伤药物诱导的凋亡,增强DNA损伤修复信号。

• 单位
  中国医学科学院基础医学研究所; 医学分子生物学国家重点实验室