反转录-重组酶介导等温扩增（RT-RAA）快速检测基因2型猪繁殖与呼吸综合征病毒

作者：陈耀; 仲欣雨; 吴陈雨; 丁雪; 黄璟; 王欢莉; 范忠军; 孙静; 陈星逸; 余树培; 夏文龙^*

来源：中国动物检疫, 2023, 40(01): 121-127.

• 猪繁殖与呼吸综合征病毒
• 基因2型
• 反转录-重组酶介导等温扩增
• 快速检测

为建立一种基因2型猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)的快速检测方法，根据其ORF6基因保守序列设计了3对特异性引物，通过引物筛选及条件优化，建立了基因2型PRRSV的反转录-重组酶介导等温扩增(reverse transcription recombinase-aided isothermal amplification,RT-RAA)快速检测方法。结果显示：该方法在40℃恒温孵育25 min即可完成靶序列扩增；特异性强，和猪伪狂犬病毒、猪细小病毒、猪圆环病毒2型、猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒均无交叉反应；灵敏度高，最低检出限为2×100 TCID50/μL，是常规RT-PCR方法的10倍；应用该方法对39份疑似PRRSV感染的临床样品进行检测，检出阳性样品25份，和实验室前期建立的荧光定量RT-PCR方法检测结果一致。以上结果说明，本研究建立的RT-RAA检测方法简便快速、特异性强、灵敏度高、临床适用性好，为PRRSV感染的快速诊断提供了新的技术手段。

• 单位
  生物工程学院; 盐城师范学院