前列腺特异性膜抗原人源Fab抗体可变区基因的筛选与鉴定

作者：黄海; 黄健; 林天歆; 许可慰; 郭正辉; 江春; 韩金利

来源：中华男科学杂志, 2007, 13(7): 601-604.

DOI：10.3969/j.issn.1009-3591.2007.07.006

• 前列腺癌
• 噬菌体展示技术
• 前列腺特异性膜抗原
• 亲和筛选
• 噬菌体抗体库

目的:筛选、鉴定抗中国人前列腺特异性膜抗原(PSMA)的人源Fab抗体可变区的编码基因,为PSMA蛋白质生物学功能的研究及前列腺癌的基因治疗研究开辟新途径. 方法: 采用噬菌体表面展示技术,以PSMA原核表达重组子pET30a(+)-PSMA诱导表达并纯化后的PSMA为固相抗原,从噬菌体Fab可变区抗体库中经过 5轮"吸附-洗脱-扩增"筛选过程,获得抗原结合活性和特异性较强的PSMA人源Fab可变区抗体基因片段的阳性克隆,并对其进行免疫检测及序列测定. 结果: 筛选得到Fab抗体克隆的Fd段基因核苷酸序列为696 bp,编码由 232个氨基酸残基组成的多肽 ,与人免疫球蛋白γ链恒定区的同源性为98%;轻链κ基因核苷酸序列为630 bp,编码由 210个氨基酸残基组成的多肽,与κ链恒定区同源性为93%. 结论: 利用噬菌体抗体库技术,成功获得了PSMA人Fab抗体可变区编码基因克隆,该克隆抗体基因具有典型的免疫球蛋白轻链和重链可变区的结构特点,基因编码产物具有与PSMA反应的免疫学活性和特异性.

• 单位
  中山大学