轮状病毒P[6]基因型毒株LL4260株的VP8~*核心区蛋白的表达和纯化

作者：王璐瑶; 李丹地^*; 孙晓曼; 章青; 王宏; 庞立丽; 胡继宏; 段招军

来源：中华实验和临床病毒学杂志, 2018, 32(02): 195-198.

DOI：10.3760/cma.j.issn.1003-9279.2018.02.019

• 轮状病毒
• P[6]基因型
• VP8*蛋白
• 蛋白表达与纯化

目的为研究P[6]基因型轮状病毒受体结合特性,利用原核表达纯化得到P[6]基因型轮状病毒LL4260毒株的VP8*核心区蛋白。方法将P[6]基因型毒株LL4 260株的质粒利用PCR扩增得到核心区基因片段,克隆到pET30a载体中构建重组质粒pET30a-LL4260VP8*core,重组质粒转化到BL21(DE3)感受态细胞中进行蛋白表达,经亲和层析和分子筛层析纯化表达后得到目的蛋白。结果 P[6]基因型轮状病毒LL4260毒株核心区pET30 a-LL4260VP8*core蛋白为可溶表达,经纯化及电泳鉴定,得到相对分子质量为22×103的目的蛋白。结论本研究构建的P[6]基因型轮状病毒LL4260毒株pET30 a-LL4260VP8*core重组质粒,表达纯化了相应核心区目的蛋白,为进一步分析蛋白的性能和结构提供基础。

• 单位
  中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所; 公共卫生学院; 甘肃中医药大学