携带p53AIP1基因的重组复制缺陷型腺病毒载体的构建、鉴定及其在人宫颈癌细胞系HeLa中的表达

作者：林晓亮; 姜云波; 赵倩; 殷小涛; 田仁礼; 李云奇; 徐元基; 阎瑾琦; 张巍; 高江平; 于继云

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2013, (10): 1082-1086.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.008287

• p53调节的凋亡诱导蛋白1
• 腺病毒载体
• HeLa细胞
• 基因治疗 p53AIP1
• adenovirus vector
• HeLa cell
• gene therapy

目的构建携带外源性p53调节的凋亡诱导蛋白1(p53AIP1)基因重组复制缺陷型腺病毒载体,观察其在HeLa细胞中的表达。方法设计针对p53AIP1基因序列并插入特定酶切位点的特异引物,通过PCR扩增p53AIP1基因序列,利用DNA重组技术将p53AIP1基因定向插入到腺病毒穿梭载体pDC316,构建穿梭质粒pDC316-p53AIP1;在LipofectamineTM2000介导下穿梭载体pDC316-p53AIP1和腺病毒骨架载体pBHGloxΔE1,3Cre共转染进HEK293细胞;通过Cre-loxP重组酶系统,使Shuttle质粒和辅助大质粒发生定点重组从而包装产生携带目的基因p5...

• 单位
  中国人民解放军总医院; 军事医学科学院基础医学研究所