摘要
目的探索新疆植物药阿里红粗多糖(fomes officinalis polysaccharides,FOPS)提取物对小鼠腹腔巨噬细胞体外抗弓形虫TgRH株速殖子感染细胞因子分泌的影响。方法建立刚地弓形虫RH速殖子与小鼠腹腔巨噬细胞接种比例为1∶5的体外感染模型,实验设空白对照组、感染对照组和高(400μg/ml)、中(200μg/ml)、低(100μg/ml)3个药物剂量的药物对照组及感染模型治疗组。以流式微球捕获芯片技术(cytometric bead array,CBA)检测各组细胞感染虫体和药物作用6、12、24、36、48 h培养上清中IL-6、IL-10、TNF、INF、IL-12p70及MCP-1细胞因子水平。结果各实验组培养上清中IL-10和INF在实验过程均无表达。空白对照组感染48 h时TNF-α、IL-12p70及MCP-1略升高。感染组IL-6随感染时间延长水平显著升高,至感染48 h达(881.05±6.99)pg/ml,与空白对照组比较差异有统计学意义(F=235.3,P<0.05);TNF-α至感染48h时达(292.30±2.63)pg/ml,高于空白对照组(F=52.45,P<0.05);MCP-1和IL-12p70至感染48 h时与空白对照组差异无统计学意义(F值分别为2.624和3.518,P均>0.05)。各剂量FOPS作用于空白小鼠腹腔巨噬细胞,培养上清中MCP-1和TNF-α随作用时间延长而显著升高,至24 h时达到高峰,之后下降。各剂量药物组与空白对照组在药物作用24 h时组间MCP-1和TNF-α水平差异有统计学意义(F分别为41.95和231.4,P均<0.05);TNF-α表达水平与药物浓度升高成正比,MCP-1在培养上清中表达水平为M-FOP>L-FOP>H-FOP>空白对照组。高剂量H-FOP作用于感染巨噬细胞36 h内IL-6表达均较低,48 h略有升高,M-FOP组和L-FOP组IL-6表达趋势与感染对照组相似,但各感染时间IL-6表达水平均低于感染对照组(F=461.9,P<0.05)。各药物组TNF-α表达水平于药物作用24 h时升高,36 h时显著降低,48 h又迅速升高,各药物组与感染对照组比较差异有统计学意义(F=163 600,P<0.05)。高剂量H-FOP组作用24 h细胞培养上清中TNF-α为(1 624.426±6.54) pg/ml,较感染对照组水平升高100倍以上,略高于M-FOP组和L-FOP组,而M-FOP组与L-FOP组差异无统计学意义(F=1.396,P>0.05)。各药物组MCP-1变化趋势同TNF-α,MPC-1表达水平随药物剂量升高而降低。各药物组对感染细胞MPC-1表达水平的影响显著强于对正常小鼠腹腔巨噬细胞的影响,其中L-FOP组药物作用24 h时感染细胞培养上清中MCP-1水平为(119.11±0.91)pg/ml,约为L-FOP药物对照组的2倍。结论阿里红多糖粗提物主要影响小鼠腹腔巨噬细胞TNF和MCP-1的表达,其中使TNF表达上调,时间持续至给药后24 h。而MCP-1的上调可能与阿里红多糖粗提物中的其他成分有关。
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单位基础医学院; 新疆医科大学; 第一临床医学院