美洲大蠊提取物对H2O2诱导的PC12细胞氧化损伤的保护作用

作者：周永芳; 管堂飞; 肖培云; 张成桂; 刘光明; 何正春^*

来源：中国医院药学杂志, 2023, 43(03): 300-308.

DOI：10.13286/j.1001-5213.2023.03.11

• 美洲大蠊提取物
• 氧化应激
• Nrf2/HO-1信号通路

目的:探讨美洲大蠊提取物(PAS840)对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤(PC12)细胞氧化损伤模型的保护作用及机制。方法:采用H2O2刺激PC12细胞建立神经细胞氧化损伤模型，实验分为正常组(Con)、模型组(Mod)、PAS840低中高剂量组(20,50,125μg·mL-1的PAS840培养基溶液进行处理),采用倒置显微镜观察细胞形态并采用CCK-8法检测各组细胞存活率，生化试剂盒检测各组超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、乳酸脱氢酶(LDH)、谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)的水平；DCFH-DA荧光探针检测各组活性氧簇(ROS)的水平；流式细胞术检测各组细胞凋亡率；JC-1法染色检测各组细胞线粒体膜电位(MMP);RT-qPCR检测各组Nrf2/HO-1通路因子(Nrf2、Keap1、HO-1和NQO1)、凋亡因子(Bcl-2、Bax和Caspase-3)、炎症因子(TNF-α、IL-1β和IL-6)、乙酰胆碱酯酶(AchE)和过氧化氢酶(CAT)mRNA的表达水平；Western blot法检测各组Nrf2、HO-1、Bcl-2、Bax和Caspase-3蛋白的表达水平。结果:PAS840可显著提高氧化损伤细胞的存活率、MMP及SOD、GSH-Px和GSH的水平，降低LDH、MDA和ROS的水平；显著降低Keap1、TNF-α、IL-1β、IL-6和AchE mRNA表达的同时，显著增加CAT和NQO1 mRNA的表达，显著降低Nrf2、Bax和Caspase-3的mRNA及其蛋白表达，显著增加HO-1和Bcl-2的mRNA及其蛋白表达。结论:PAS840可以抑制H2O2诱导的PC12细胞凋亡，减轻炎症，其机制可能与降低ROS、调控Nrf2/HO-1通路因子减轻细胞的氧化损伤程度有关。

• 单位
  大理大学