PTX对GPER介导的雌激素激活的子宫内膜癌细胞中PI3K/Akt信号通路的影响

作者：郭瑞霞; 雷佳; 王新燕; 葛新; 胡冬梅; 马秀英; 李留霞; 乔玉环

来源：中华妇产科杂志, 2013, 48(2): 129-133.

DOI：10.3760/cma.j.issn.0529-567x.2013.02.010

• 子宫内膜肿瘤
• 受体
• G蛋白偶联
• 百日咳毒素
• 1-磷脂酰肌醇3-激酶
• 原癌基因蛋白质c-akt

目的 研究百日咳毒素(PTX)对G蛋白偶联ER(GPER)介导的雌激素激活的子宫内膜癌细胞系Ishikawa和HEC-1A细胞中磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路的影响.方法 采用免疫组化SP法检测Ishikawa和HEC-1A细胞中GPER蛋白的表达.将不同浓度(0、0.1、0.5、1.0 μg/ml)的PTX分别处理Ishikawa和HEC-1A细胞30 min后,再予上述浓度的PTX分别联合17β雌二醇(17β-E2；1×10-6molL)共同处理HEC-1A细胞15 min、Ishikawa细胞30 min,采用蛋白印迹法检测Ishikawa和HEC-1A细胞中GPER、ERα、ERβ蛋白的表达及Akt的活化状态[Akt的活化状态以磷酸化Akt(p-Akt)/Akt表示].结果(1)免疫组化法检测显示,在Ishikawa和HEC-1A细胞中GPER蛋白均在细胞质中呈棕黄色阳性表达.(2)蛋白印迹法检测显示,不同浓度(0、0.1、0.5、1.0μg/ml)的PTX联合17β-E2(1×10-6 mol/L)处理后,在Ishikawa细胞中,p-Akt/Akt分别为0.74±0.54、0.34 ±0.06、0.18±0.03、0.07±0.15,GPER蛋白的表达水平分别为0.872±0.490、0.395 ±0.054、0.145 ±0.014、0.034±0.008,随着PTX浓度的增加,p-Akt/Akt、GPER蛋白的表达水平均明显下降(P＜0.05),且当PTX浓度为1.0μg/ml时下降最显著(F=63.729,P=0.0001;F ＝160.284,P=0.0001)；而ERα和ERβ蛋白的表达水平均无明显变化(P＞0.05).在HEC-1A细胞中,p-Akt/Akt分别为0.73 ±0.09、0.26±0.14、0.11 ±0.03、0,GPER蛋白的表达水平分别为0.927±0.134、0.485±0.022、0.194±0.004、0,随着PTX浓度的增加,p-Akt/Akt、GPER蛋白的表达水平均明显下降(P＜0.05),且当PTX浓度为1.0 μg/ml时均降至0(F=1039.321,P=0.0001；F=109.646,P=0.0001)；而ERα蛋白的表达水平无明显变化(P＞0.05),ERβ蛋白呈阴性表达.结论 在子宫内膜癌HEC-1A和Ishikawa细胞中,FTX阻断GPER后,可抑制雌激素对子宫内膜癌细胞PI3K/Akt信号通路的活化作用.

• 单位
  郑州大学第一附属医院