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摘要
选择性剪接是真核生物精密调控组织细胞类型和发育的重要方式。过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptor γ, PPARγ)是脂肪细胞分化的关键调控因子，其前体mRNA可能通过选择性剪接产生外显子5跳跃的亚型PPARγΔ5，影响脂肪细胞分化。本研究从3日龄仔猪(Sus scrofa)皮下脂肪组织中分离培养前体脂肪细胞，诱导分化，以qPCR检测基因mRNA表达。结果显示，PPARγΔ5在猪脂肪细胞分化早期表达极显著提高，中期达到高峰，后期极显著降低(P<0.01)，其变化趋势与PPARγ及富含丝氨酸/精氨酸剪接因子(serine/arginine-rich splicing factor 1, SRSF1)一致。PPARγ激动剂罗格列酮处理可极显著提高细胞PPARγΔ5和SRSF1表达(P<0.01)，而拮抗剂GW9662可极显著降低其表达(P<0.01)。构建PPARγΔ5-siRNA重组慢病毒，转染猪前体脂肪细胞，PPARγΔ5表达极显著降低约75%(P<0.01)。与转染阴性对照慢病毒和未转染细胞相比，PPARγΔ5表达沉默显著促进前体脂肪细胞分化及PPARγ和脂肪酸结合蛋白4(fatty acid-binding protein 4, FABP4)、硬脂酰辅酶A去饱和酶(stearoyl-CoA desaturase, SCD)基因的表达(P<0.05)，显著下调脂蛋白脂酶(lipoprotein lipase, LPL)基因mRNA表达(P<0.05)。本研究提示，猪脂肪细胞依赖SRSF1及PPARγ的表达和活性，通过选择性剪接产生PPARγΔ5;PPARγΔ5是脂肪细胞分化的抑制子，可能通过负调控PPARγ表达减弱猪前体脂肪细胞分化。本研究结果为揭示猪脂肪形成的机制提供了新的依据。
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