重组嗜热栖热菌海藻糖合酶制备海藻糖的工艺条件优化

作者：宿玲恰; 张悦; 吴敬

来源：基因组学与应用生物学, 2015, 34(07): 1461-1467.

DOI：10.13417/j.gab.034.001461

• 嗜热栖热菌
• 海藻糖合酶
• 海藻糖
• 克隆表达

海藻糖具有独特的生物活性,在多种行业应用广泛。海藻糖合酶能够专一性催化麦芽糖一步生成海藻糖。本文通过PCR扩增获得了来源于Thermus thermophilus ATCC33923的海藻糖合酶基因Tre S,构建了基因工程菌E.coli BL21(DE3)/p ET-24a(+)-Tre S。工程菌在摇瓶中发酵28 h时,胞内海藻糖合酶酶活达到最高值为6.4 U/m L。进一步研究了该重组酶制备海藻糖的影响因素,发现当以10%麦芽糖为底物,初始反应p H 7.5,加酶量为15 U/g麦芽糖,40℃,150 r/min反应24 h,转化率达到最高值,为49.0%。当底物浓度提高至20%40%时,转化率为45.4%46.2%。

• 单位
  工业生物技术教育部重点实验室; 食品科学与技术国家重点实验室; 生物工程学院; 江南大学