β-葡聚糖联合激发型抗CD40单克隆抗体对树突状细胞免疫功能影响的体外研究

作者：谢叶文; 丁骏; 潘洁; 陈洁; 宁永玲; 戚春建^*

来源：中华微生物学和免疫学杂志, 2020, 40(10).

• β-葡聚糖
• 树突状细胞
• 激发型抗CD40单克隆抗体

目的探讨β-葡聚糖联合激发型抗CD40单克隆抗体(5C11)对树突状细胞(DCs)的作用及分子机制。方法采用密度梯度离心法从健康人新鲜的浓缩白细胞中分离出单个核细胞, 使用GM-CSF和IL-4细胞因子法诱导培养未成熟DCs, 经不同刺激方式(5C11、β-葡聚糖、5C11+β-葡聚糖)激发后, 流式细胞术检测不同组DCs表面共刺激分子CD40、CD80、CD83、CD86和MHCⅡ类分子HLA-DR的表达, ELISA法检测IL-12、IL-6、TNF-α、IL-10等相关细胞因子的表达, Western blot检测MAPK信号通路中相关蛋白质的磷酸化水平。结果β-葡聚糖能够显著诱导CD40在DCs表面的表达(P<0.05), 联合5C11后, 其他表面分子CD80、CD83、CD86的表达进一步显著上调, 尤其对DCs成熟的重要标志分子CD83的上调表现出强烈的协同效应(P<0.01);ELISA检测结果显示β-葡聚糖联合5C11可以诱导DCs大量分泌IL-12、IL-6、TNF-α等促炎因子, 对发挥DCs功能的关键因子IL-12的分泌表现出协同效应(P<0.01);Western blot结果显示p38 MAPK、p44/42 MAPK的磷酸化水平显著上升, 且磷酸化时间提前, 维持时间也延长(P<0.01)。结论β-葡聚糖联合5C11可协同促进DCs的成熟并提高DCs的免疫功能, 为肿瘤DCs疫苗的制备方案提供了新思路。

• 单位
  常州市第二人民医院; 中心实验室