p38 MAPK调控慢性缺氧诱导的星形胶质细胞AQP9的表达

作者：陈俊宏; 易耀兴; 何雪婷; 杨美^*; 高飞; 孙善全

来源：中国组织化学与细胞化学杂志, 2020, 29(03): 210-216.

DOI：10.16705/j.cnki.1004-1850.2020.03.002

• AQP9
• HIF-1α
• p38-MAPK
• 慢性缺氧
• 乳酸

目的利用原代星形胶质细胞慢性缺氧模型,探讨在缺氧状态下星形胶质细胞水通道蛋白9 (aquaporin-9, AQP9)的表达变化及其调控机制。方法将Sprague-Dawley (SD)大鼠原代星形胶质细胞随机分为对照组和缺氧损伤模型组,其中缺氧损伤模型分别缺氧12h、24h、48h、72h,共计4个时间点;采用乳酸(lactic acid,LD)和乳酸脱氢酶活性(lactate dehydrogenase,LDH)试剂盒分别测定培养液中LD含量及LDH活性;运用免疫荧光法检测各组AQP9的分布及表达水平,运用免疫印迹法测定各组AQP9,HIF-1α和p38-MAPK的相对表达量。结果与对照组相比,缺氧损伤模型组细胞培养液中LD含量和LDH活性均増高,且随缺氧时间延长逐渐上升,于72h达高峰;免疫荧光结果显示,对照组中,AQP9在细胞胞膜和胞浆的表达呈弱阳性,而在缺氧组中,随着缺氧时间的延长,AQP9的表达逐渐增强;免疫印迹结果显示,与对照组相比,AQP9、HIF-1α、p-p38/p38表达逐渐増加,而给予p38抑制剂(SB203580)可以降低AQP9的表达。结论星形胶质细胞慢性缺氧后,细胞胞外的乳酸浓度增加,AQP9的表达上调,表达上调可能与乳酸的转运有关;p38-MAPK信号通路可能协同调控AQP9的表达。

• 单位
  重庆医科大学; 重庆医科大学附属第一医院