白木香转录因子AsNAC2的克隆及表达分析

作者：张玉秀; 刘培卫^*; 吕菲菲; 杨云; 徐艳红; 高志晖; 魏建和^*

来源：中草药, 2022, 53(15): 4807-4812.

DOI：10.7501/j.issn.0253-2670.2022.15.024

• 白木香
• 转录因子
• NAC
• 克隆
• 表达分析

目的 对珍稀南药沉香基原植物白木香Aquilaria sinensis As NAC2转录因子进行分子克隆，并对其进行生物信息学和表达模式分析。方法 以白木香茎的总RNA反转录的c DNA为模板，采用PCR技术获取基因编码序列（coding sequence,CDS）全长；利用生物信息学软件预测蛋白的理化性质、结构域和亚细胞定位等特性；运用DNAMAN8.0和MEGA6.0等软件分别进行多序列比对和进化关系分析；利用qRT-PCR技术检测AsNAC2基因在不同组织和伤害胁迫下的表达特性。结果克隆获得AsNAC2基因（GenBank注册号MT130201），开放阅读框（openreadingframe,ORF）全长864bp，编码1条由287个氨基酸组成的弱酸性的稳定的亲水性蛋白，该蛋白定位在细胞核中，不存在跨膜结构域。序列比对和系统进化树分析显示，As NAC2蛋白N端具有典型的NAM结构域，与锦葵目中的可可、哥伦比亚锦葵和榴莲NAC 2-like蛋白亲缘关系近，属于NAC转录因子家族中的ATAF亚组。qRT-PCR结果显示，AsNAC2基因主要在健康白木香的根和茎中表达，全断干伤害可显著诱导茎中AsNAC2基因表达量的上调，在2 h达到峰值，此后缓慢下降，至48 h基本恢复正常。结论 首次在白木香中克隆和鉴定了AsNAC2基因，该基因易受伤害诱导表达，且在伤害早期相对应。

• 单位
  中国医学科学院药用植物研究所; 中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室; 国家中医药管理局