CD133抑制剂对人胆囊癌细胞的影响

作者:郭跃; 王少波; 刘超; 王世行; 庞志刚*
来源:中华实验外科杂志, 2022, 39(07): 1284-1287.

摘要

目的观察Bufalin(蟾蜍灵)、AMD3100(普乐沙福)作为药物单独或联合作用于胆囊癌细胞株(GBC-SD)后, 观察其对细胞增殖、迁移、凋亡以及CD133表达的影响, 探讨其在胆囊癌中的作用。方法收集2017年1月至2021年12月郑州大学第二附属医院手术切除的胆囊癌标本20例, 通过免疫组织化学法检测CD133在肿瘤以及癌旁组织的表达的差异。用不同浓度的Bufalin(80、160、320 nmol/L);AMD3100(10、20、40 μmol/L)及联合用药(Bufalin 160 nmol/L+AMD3100 20 μmol/L)干预人胆囊癌(GBC-SD)细胞, 细胞计数试剂盒(CCK-8)法观察药物对肿瘤细胞增殖产生的影响, Transwell小室法检测肿瘤细胞迁移能力, 膜联蛋白V(Annexin V)/碘化丙锭(PI)法检测细胞凋亡, 流式细胞法检测细胞CD133分子表达。率的比较采用χ2检验, 组间比较用单因素及双因素方差分析。结果免疫组织化学结果示CD133分子在人胆囊癌组织中的阳性表达率为85%, 明显高于癌旁组织表达率[30%, χ2=10.23, P<0.01], 表达定位于胞质和胞核, 流式结果显示CD133在GBC-SD细胞中阳性表达。Bufalin(80、160、320 nmol/L)作用(24、48、72 h)后与对照比较实验组细胞增殖受到明显抑制(F=21.389、57.231、73.444, P<0.05)。160 nmol/L的Bufalin作用后细胞迁移数为(114.33±5.51), 明显低于对照组(270.67±13.65, F=241.989, P<0.01)。CD133分子表达水平为(1.48±0.14), 低于对照组(3.22±0.46, F=202.589, P<0.01), 细胞凋亡率[(32.57±0.69)%]高于对照组[(16.35±0.33)%, F=171.288, P<0.01]。AMD3100组中, 与对照组比较AMD3100 20 μmol/L作用48 h细胞活性为(87.58±7.10)%, 40 μmol/L作用48 h为(67.84±0.75)%(F=57.231, P<0.05), 40 μmol/L作用72 h[(72.57±10.23)%, F=73.444, P<0.05]使细胞增殖明显受抑。40 μmol/L的AMD3100作用后, 与对照组细胞迁移个数[(270.67±13.65)个]明显低于实验组[(193.33±8.08)个, F=241.898, P<0.01]。CD133分子表达水平实验组为3.07±0.11, 对照组为3.22±0.46, 差异无统计学意义(F=202.589, P>0.05)。凋亡率对照组为(16.35±0.33)%, 实验组为(16.37±1.81)%, 差异无统计学意义(F=171.228, P>0.05)。联合用药组(Bufalin 160 nmol/L+AMD3100 20 μmol/L)与对照组比较各时间(24、48、72 h)细胞增殖均受到抑制(F=21.389、57.231、73.444, P<0.05);细胞迁移个数为(270.67±13.65)个, 实验组为(133.67±6.50)个, 差异有统计学意义(F=241.898, P<0.01)。CD133分子表达水平(2.19±0.68)低于对照组(3.22±0.46, F=202.589, P<0.01)。细胞凋亡率[(33.58±1.67)%]高于对照组[(16.35±0.33)%, F=171.228, P<0.01]。结论 CD133在GBC-SD细胞中阳性表达, 在胆囊癌组织中的阳性表达率明显高于癌旁组织。Bufalin、AMD3100可抑制胆囊癌细胞增殖、迁移。Bufalin单独以及与AMD3100联合用药抑制胆可囊癌细胞增殖、迁移、并促进细胞凋亡、抑制CD133分子表达。

  • 单位
    郑州大学第二附属医院