婴儿双歧杆菌介导HSV-TK/GCV对裸鼠肾癌组织细胞凋亡及p-Stat3、Bcl-xL表达的影响

作者：任劲; 肖啸; 蒋立; 杨柒; 唐伟

来源：第三军医大学学报, 2014, 36(04): 375-380.

DOI：10.16016/j.1000-5404.2014.04.014

• 婴儿双歧杆菌
• HSV-TK/GCV
• 基因治疗
• 肾癌
• p-Stat3
• Bcl-xL

目的评价婴儿双歧杆菌介导单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-TK)/丙氧鸟苷(GCV)自杀基因治疗系统对裸鼠肾癌的疗效,初步探讨其诱导肾癌组织细胞凋亡及对肾癌组织p-Stat3、Bcl-xL表达的影响。方法采用肾癌786-O细胞悬液皮下注射法建立裸鼠肾癌模型,将模型裸鼠分为4组,分别经尾静脉注射生理盐水(生理盐水组)、婴儿双歧杆菌(婴儿双歧杆菌组)、携带空质粒pGEX-5X-1的婴儿双歧杆菌(空质粒组)、携带重组质粒pGEX-TK的婴儿双歧杆菌(重组质粒组),再联合腹腔注射GCV。治疗4周结束后,称取各组裸鼠质量及荷瘤质量。TUNEL染色法检测各组肾癌组织细胞凋亡情况。免疫组化染色法检测各组肾癌组织p-Stat3、Bcl-xL蛋白表达情况。Real-time PCR检测各组肾癌组织Stat3、Bcl-xL mRNA表达水平。Western blot检测各组肾癌组织p-Stat3、Bcl-xL蛋白表达水平。结果治疗后,重组质粒组较空质粒组、婴儿双歧杆菌组和生理盐水组裸鼠质量增加(P<0.05),荷瘤质量降低(P<0.05)。TUNEL染色结果显示重组质粒组凋亡指数明显高于空质粒组、婴儿双歧杆菌组和生理盐水组(P<0.01)。免疫组化染色结果显示重组质粒组肾癌组织p-Stat3、Bcl-xL蛋白表达明显低于空质粒组、婴儿双歧杆菌组和生理盐水组(P<0.01)。重组质粒组肾癌组织Stat3、Bcl-xL mRNA及p-Stat3、Bcl-xL蛋白表达水平较空质粒组、婴儿双歧杆菌组和生理盐水组明显下调(P<0.01)。结论婴儿双歧杆菌介导HSV-TK/GCV自杀基因治疗系统明显抑制裸鼠肾癌生长,可能通过抑制Stat3活化进而阻断Stat3信号转导通路,下调其下游抗凋亡蛋白Bcl-xL的表达来诱导裸鼠肾癌组织细胞凋亡,发挥抑瘤作用。

• 单位
  重庆医科大学附属第一医院