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摘要
目的 在正常人小肠上皮细胞系FHs 74 Int中观察中脑星形胶质细胞源性神经营养因子(mesencephalic astrocyte-derived neurotrophic factor, MANF)对内质网(endoplasmic reticulum, ER)应激诱导的肠道上皮细胞损伤的保护作用。方法 分别用ER应激诱导剂tunicmycin(TM)或TNF-α刺激FHs 74 Int细胞，观察内源性MANF的表达；将MANF-GFP质粒转染FHs 74 Int细胞，用免疫印迹法(Western blot)观察MANF对ER应激指标的影响；CCK8细胞增殖实验检测MANF对肠上皮细胞发生ER应激后增殖能力的影响；Western blot和流式细胞术(Flow cytometry)检测MANF对ER应激后细胞凋亡的影响。结果 ER应激可以诱导小肠上皮细胞内源性MANF的表达;过表达MANF可以明显抑制小肠上皮细胞内的ER应激相关蛋白Bip和CHOP的表达，并可以促进肠上皮细胞的增殖能力;减少促凋亡蛋白cleavedcaspase-3和Bax的生成，促进抗凋亡蛋白Bcl-2的表达，并且抑制肠上皮细胞早期凋亡和晚期凋亡的比例。结论MANF通过抑制小肠上皮细胞内的ER应激，促进细胞增殖，减少细胞凋亡，从而发挥肠黏膜屏障保护作用。
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