HMGB1 A盒与LBPK95A融合基因的构建和原核表达

作者：姜南艳; 于文彬; 苏明权; 沈建军; 李立文; 郝晓柯; 张惠中

来源：现代检验医学杂志, 2008, (06): 9-11.

• HMGB1A盒
• LBPK95A
• 加端-PCR
• 基因表达
• 纯化

目的克隆、表达高迁移率族蛋白1A盒(HMGB1A box)与LBPK95A的融合基因。方法经加端-PCR获得HMGB1A盒与LBPK95A的融合基因。该基因克隆到pGEX-4T-2载体中转化TOP10感受态细胞,测序鉴定。将A-LBP质粒转化E.coliBL21,30℃诱导表达4h,超声裂解后经GSTrapFF蛋白纯化柱纯化,进行SDS-PAGE分析。结果DNA测序证明,获得了HMGB1A盒与LBPK95A的融合基因。SDS-PAGE分析表明,A-LBP融合蛋白在原核中获得高效表达,表达量约占菌体总蛋白的28,GSTrapFF纯化后获得目的蛋白。结论成功表达和纯化了HMGB1A盒与LBPK95A的融合蛋白。

• 单位
  西京医院; 第四军医大学