解藻酸弧菌株ATCC 17749中海藻酸裂解酶基因的克隆与鉴定

作者：胥晴晴; 朱云霞; **平; 叶江; 张惠展

来源：华东理工大学学报, 2013, (01): 29-32+34+41.

DOI：10.14135/j.cnki.1006-3080.2013.01.001

• 解藻酸弧菌ATCC 17749
• 海藻酸裂解酶
• 大肠杆菌
• 异源表达
• 酶活测定 Vibrio alginolyticus ATCC 17749
• alginate lyases
• Escherichia coli
• heterologous expression
• activity determination

以解藻酸弧菌株(Vibrio alginolyticus)ATCC 17749为研究对象,利用生物信息学寻找并预测得到5个可能的海藻酸裂解酶基因algV1、algV2、algV3、algV4和algV5。通过构建5个以pET-28a(+)为载体的大肠杆菌表达质粒pET28a-algV1、pET28a-algV2、pET28a-algV3、pET28a-algV4和pET28a-algV5,实现了5个基因的异源表达,并经海藻酸裂解酶定量和定性的活性分析,确定5个基因的编码产物都具有海藻酸裂解酶活性,其中重组的algV1、algV2和algV3为胞外酶,algV4和algV5为胞内酶。

• 单位
  生物反应器工程国家重点实验室; 华东理工大学