层粘连蛋白γ2诱导小鼠肝细胞AML12细胞发生上皮-间质转化

作者：陈辉^*; 张继舜

来源：中国生物工程杂志, 2023, 43(11): 1-7.

DOI：10.13523/j.cb.2305043

• 肝细胞
• 转化生长因子-β1
• 层粘连蛋白
• 肝纤维化
• 上皮-间质转化

目的：观察层粘连蛋白γ2(lamininγ2,LAMC2)对小鼠肝细胞AML12分化的作用，探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)信号通路对AML12细胞LAMC2表达的影响。方法：利用小鼠LAMC2慢病毒过表达载体转染AML12细胞，通过实时荧光定量PCR(qPCR)观察LAMC2对AML12细胞分化的影响。利用TGF-β1和TGF-β1通路抑制剂(SB431542)刺激AML12细胞，明确TGF-β1信号通路对LAMC2表达的作用。最后利用小干扰RNA(siRNA)抑制AML12细胞LAMC2表达，通过qPCR和Western blot检测TGF-β1预处理AML12细胞后对其分化的影响。结果：过表达LAMC2显著上调AML12细胞间质细胞相关标志物α-SMA和1型胶原蛋白(Col1a1)mRNA水平，下调成熟肝细胞标志物白蛋白(ALB)mRNA水平。TGF-β1成功诱导小鼠肝细胞AML12细胞发生上皮-间质转化。TGF-β1上调AML12细胞Tgfbr1和LAMC2的mRNA表达水平，并且与TGF-β1的作用时间呈正相关，差异具有统计学意义(P<0.05)。TGF-β1诱导AML12细胞发生上皮-间质转化和促进LAMC2表达的作用，皆可被TGF-β1通路抑制剂SB431542阻断。重要的是，抑制肝细胞LAMC2表达可有效阻断TGF-β1诱导AML12细胞上皮-间质转化。结论：LAMC2参与TGF-β1诱导小鼠肝细胞AML12细胞上皮-间质转化，抑制LAMC2阻断TGF-β1诱导上皮-间质转化。

• 单位
  首都医科大学附属北京朝阳医院