维生素D对脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤的影响

作者：李茜; 赵燕; 王导新^*

来源：第三军医大学学报, 2019, 41(14): 1314-1320.

DOI：10.16016/j.1000-5404.201901235

• 维生素D
• 急性呼吸窘迫综合征
• 急性肺损伤
• Th17细胞

目的探讨维生素D(vitamin D, VD)对脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导的小鼠急性肺损伤的影响及其可能的机制。方法将45只雄性C57BL/6小鼠按随机数字表法分为3组(n=15):对照组、LPS组、维生素D补充组(VD+LPS组)。LPS构建小鼠急性肺损伤模型前,VD+LPS组予以25μg/kg灌胃补充3剂1,25二羟维生素D3;对照组及LPS组予以相同体积的0.1%二甲基亚砜(dimethylsulfoxide, DMSO)灌胃。气管插管给予3 mg/kg LPS构建小鼠急性肺损伤模型,造模后2 d处死小鼠。检测支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid, BALF)细胞总数、中性粒细胞比例和蛋白浓度。酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)检测BALF中白细胞介素-6(interleukin-6, IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)及白细胞介素-17A(IL-17A)水平。HE染色观察肺组织病理改变,以肺组织湿/干质量比(wet to dry ratio, W/D)评估肺组织水肿情况,流式细胞术检测肺组织辅助性T细胞17(T helper 17 cells, Th17)比例。Western blot和qPCR检测Th17细胞特征性转录因子维甲酸相关孤核受体γt(retinoic acid-related orphan receptorγt, RORγt)表达水平。结果补充维生素D明显减轻LPS造模小鼠肺损伤严重程度。与LPS组比较,VD+LPS组BALF细胞总数、中性粒细胞比例、蛋白浓度降低(P<0.05)。相较于LPS组,VD+LPS组BALF中IL-6、TNF-α及IL-17A水平降低(P<0.05)。与LPS组相比,VD+LPS组Th17细胞比例明显降低,RORγt蛋白及核酸表达显著下降(P<0.05)。结论维生素D可能通过抑制Th17细胞介导的炎症反应以减轻LPS诱导的小鼠急性肺损伤。

• 单位
  重庆医科大学附属第二医院