Lmo7对MC3T3-E1细胞增殖、迁移及成骨分化影响的实验研究

作者：毛佳奕; 王佐林^*

来源：口腔颌面外科杂志, 2023, 33(06): 355-362.

• Lmo7
• MC3T3-E1细胞
• RNA干扰

目的：研究Lmo7基因对小鼠胚胎成骨细胞前体细胞(mouse embryo osteoblast precursor cells,MC3T3-E1 cells增殖、迁移及成骨能力的影响。方法：体外培养MC3T3-E1细胞并对其进行成骨诱导，在0、3、7、14 d时收样，通过实时定量聚合酶链反应（real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR）与蛋白质印迹法（Western blotting）验证Lmo7的表达变化。利用慢病毒转染pLV-shLmo7获得稳定干扰Lmo7表达的细胞株，并通过CCK-8实验、EdU细胞增殖实验、细胞划痕实验、Transwell实验检测Lmo7对细胞增殖、迁移能力的影响。通过碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）染色法检测ALP的表达活性，通过RT-qPCR检测成骨相关基因Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,Runx2)、Osterix、ALP、骨钙素（osteocalcin,OCN）的表达。结果：Lmo7基因在成骨诱导的过程中表达上调。成功构建了Lmo7干扰的稳转细胞株，其增殖活性显著提高，而迁移能力受到抑制。对其进行成骨诱导后发现，与对照组相比，Lmo7干扰稳转株的ALP染色较浅，成骨相关基因Runx2、Osterix、ALP、OCN表达水平明显下调，且差异具有统计学意义（P<0.05）。结论：Lmo7低表达后可促进细胞增殖，抑制细胞迁移，下调Runx2、Osterix、ALP、OCN的表达能够抑制MC3T3-E1细胞体外成骨分化。

• 单位
  同济大学; 同济大学附属口腔医院