人卵泡液抑制素B的分离与鉴定

作者：杜江; 辛玲; 郭颖; 周芳; 于和鸣

来源：生殖医学杂志, 2015, 24(09): 748-752.

DOI：10.3969/j.issn.1004-3845.2015.09.013

• 卵泡液
• 抑制素
• 乙腈
• 等电点
• 分离与纯化

目的探讨人卵泡液抑制素B(INH-B)的分离纯化方法。方法收集25例育龄期女性成熟卵泡液,分别用乙腈、丙酮、乙醇3种试剂处理样品,富集低丰度蛋白,经蛋白浓度测定和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析,比较3种方法对高丰度蛋白去除效果。再通过二乙基氨乙基(DEAE)阴离子交换柱和蛋白质等电点分离法分离目的蛋白。结果采用乙腈沉淀法能去除卵泡液样品中约88.7%的高丰度蛋白。并用乙腈富集、阴离子交换柱分离、等电点分离的"三步分离法"分离人卵泡液后,INH-B蛋白回收率为38.7%,等电点为4.55。结论乙腈沉淀法是一种较为有效的去除样品中高丰度蛋白、富集低丰度蛋白的方法。乙腈富集、阴离子交换柱分离、等电点分离的"三步分离法"能初步纯化获得人体天然INH-B蛋白分子粗制品,纯化回收率达38.70%。

• 单位
  北京协和医学院; 国家卫生计生委科学技术研究所